Что обозначает чувствительность к антибиотикам
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К АНТИБИОТИКАМ:
МЕТОДЫ, РЕЗУЛЬТАТЫ, ОЦЕНКА
Решедько Галина Константиновна,
к.м.н., ассистент кафедры клинической фармакологии
Смоленской государственной медицинской академии
214019, г.Смоленск, ул.Крупской, 28, а/я № 5.
Тел.: +7(0812) 61 13 01, 61 13 27, Факс: (0812) 61 12 94,
E-Mail: galina@antibiotic.ru
Содержание
Резюме
В лекции рассмотрены основные методы определения чувствительности in vitro микроорганизмов к антимикробным препаратам (диско-диффузионный, Е-тестов, методы разведения). Отражены подходы к эмпирическому и этиотропному назначению антибиотиков в клинической практике. Обсуждены вопросы интерпретации результатов определения чувствительности с клинической и микробиологической точек зрения.
В настоящее время в клинической практике существуют два принципа назначения антибактериальных препаратов: эмпирическое и этиотропное. Эмпирическое назначение антибиотиков основано на знаниях о природной чувствительности бактерий, эпидемиологических данных о резистентности микроорганизмов в регионе или стационаре, а также результатах контролируемых клинических исследований. Несомненным преимуществом эмпирического назначения химиопрепаратов является возможность быстрого начала терапии. Кроме того, при таком подходе исключаются затраты на проведение дополнительных исследований.
|
Однако при неэффективности проводимой антибактериальной терапии, при нозокомиальных инфекциях, когда затруднительно предположить возбудителя и его чувствительность к антибиотикам стремятся проводить этиотропную терапию. Этиотропное назначение антибиотиков предполагает не только выделение возбудителя инфекции из клинического материала, но и определение его чувствительности к антибиотикам. Получение корректных данных возможно только при грамотном выполнении всех звеньев бактериологического исследования: от взятия клинического материала, транспортировки его в бактериологическую лабораторию, идентификации возбудителя до определения его чувствительности к антибиотикам и интерпретации полученных результатов.
|
Методы определения чувствительности к антибиотикам
Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам делятся на 2 группы: диффузионные и методы разведения.
Рисунок 1. Определение чувствительности микроорганизмов диско-диффузионным методом.
Определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста проводится аналогично тестированию диско-диффузионным методом. Отличие состоит в том, что вместо диска с антибиотиком используют полоску Е-теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной (рис. 2). В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной подавляющей концентрации (МПК).
Рисунок 2. Определение чувствительности микроорганизмов с помощью Е-тестов.
Несомненным достоинством диффузионных методов является простота тестирования и доступность выполнения в любой бактериологической лаборатории. Однако с учетом высокой стоимости Е-тестов для рутинной работы обычно используют диско-диффузионный метод.
Рисунок 3. Определение значения МПК методом разведения в жидкой питательной среде.
Интерпретация результатов определения чувствительности
На основании получаемых количественных данных (диаметра зоны подавления роста антибиотика или значения МПК) микроорганизмы подразделяют на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные (рис. 4). Для разграничения этих трех категорий чувствительности (или резистентности) между собой используют так называемые пограничные концентрации (breakpoint) антибиотика (или пограничные значения диаметра зоны подавления роста микроорганизма).
Рисунок 4. Интерпретация результатов определения чувствительности бактерий в соответствии со значениями МПК.
Существуют два подхода к интерпретации результатов определения чувствительности: микробиологический и клинический. Микробиологическая интерпретация основана на анализе распределения значений концентраций антибиотика, подавляющих жизнеспособность бактерий. Клиническая интерпретация основана на оценке эффективности антибактериальной терапии.
Чувствительные микроорганизмы (susceptible)
Клинически к чувствительным относят бактерии (с учетом параметров, полученных in vitro), если при лечении стандартными дозами антибиотика инфекций, вызываемых этими микроорганизмами, наблюдают хороший терапевтический эффект.
При отсутствии достоверной клинической информации подразделение на категории чувствительности базируется на совместном учете данных, полученных in vitro, и фармакокинетики, т.е. на концентрациях антибиотика, достижимых в месте инфекции (или в сыворотке крови).
Резистентные микроорганизмы (resistant)
К резистентным (устойчивым) относят бактерии, когда при лечении инфекции, вызванной этими микроорганизмами, нет эффекта от терапии даже при использовании максимальных доз антибиотика. Такие микроорганизмы имеют механизмы резистентности.
Микроорганизмы c промежуточной резистентностью (intermediate)
Клинически промежуточную резистентность у бактерий подразумевают в случае, если инфекция, вызванные такими штаммами, может иметь различный терапевтический исход. Однако лечение может быть успешным, если антибиотик используется в дозировке, превышающей стандартную, или инфекция локализуется в месте, где антибактериальный препарат накапливается в высоких концентрациях.
С микробиологической точки зрения к бактериям с промежуточной резистентностью относят субпопуляцию, находящуюся в соответствии со значениями МПК или диаметра зон, между чувствительными и резистентными микроорганизмами. Иногда штаммы с промежуточной резистентностью и резистентные бактерии объединяют в одну категорию резистентных микроорганизмов.
Необходимо отметить, что клиническая интерпретация чувствительности бактерий к антибиотикам является условной, поскольку исход терапии не всегда зависит только от активности антибактериального препарата против возбудителя. Клиницистам известны случаи, когда при резистентности микроорганизмов, по данным исследования in vitro, получали хороший клинический эффект. И наоборот, при чувствительности возбудителя может наблюдаться неэффективность терапии.
В определенных клинических ситуациях, когда недостаточно результатов исследования чувствительности обычными методами, определяют минимальную бактерицидную концентрацию.
Значение МБК используют при терапии антибиотиками, обладающими бактериостатическим действием, или при отсутствии эффекта от антибактериальной терапии у особой категории больных. Частными случаями для определения МБК могут быть, например, бактериальный эндокардит, остеомиелит или генерализованные инфекции у пациентов с иммунодефицитными состояниями.
В заключение хотелось бы отметить, что на сегодняшний день не существует методов, которые позволили бы с абсолютной достоверностью прогнозировать клинический эффект антибиотиков при лечении инфекционных болезней. Однако, данные результатов определения чувствительности могут служить хорошим ориентиром клиницистам для выбора и коррекции антибактериальной терапии.
Таблица 1. Критерии интерпретации чувствительности бактерий
Анализ мокроты на чувствительность к антибиотикам
«Анализ мокроты на чувствительность к антибиотикам»
Анализ мокроты на чувствительность к антибиотикам позволит точно определить возбудителя болезни и подобрать эффективное лечение. Во время микроскопического исследования специалист определяет ДНК микроорганизмов в отделяемом, а также их концентрацию. Тест также включает проверку реакции бактерий на лекарственные препараты. По результатам анализа пациент получит рекомендации по лечению.
Анализ мокроты на чувствительность к антибиотикам требует специальной подготовки. Отделяемое сдают утром, натощак, методом отхаркивания. Перед этим необходимо тщательно почистить зубы и прополоскать рот. Для лучшего отделения слизи за день до теста рекомендуют пить больше жидкости. Исследование не проводят на фоне приема антибиотиков или противовоспалительных средств.
При сухом кашле для забора мокроты используют катетер или проводят биопсию. Манипуляции не входят в стоимость анализов на чувствительность к антибиотикам, оплачиваются отдельно.
Анализ мокроты на посев с определением чувствительности к антибиотикам
Анализ мокроты является одним из ключевых методов дифференциальной диагностики всевозможных бронхолегочных патологий: пневмоний, абсцесса, бронхоэктатической болезни и др. При этом такой метод лабораторного исследования, как посев мокроты, позволяет точноопределить качественный состав исследуемого биоматериала, выявить в нем патогенные микроорганизмы (или условно-патогенные микроорганизмы в высоком титре) и определить их чувствительность к конкретным группам антибиотиков и бактериофагов. Благодаря этому, данный анализ позволяет подобрать эффективное лечение даже в ситуации, когда наблюдается устойчивость патогенных микроорганизмов к многим антибактериальным препаратам.
Когда назначается анализ мокроты на посев с определением чувствительности к антибиотикам?
Проведение микробиологического исследования мокроты путем бактериологического посева с последующим определением чувствительности к антибиотикам выполняется:
Сбор биоматериала
Мокрота на посев собирается утром до первого приема пищи в специальный стерильный контейнер с плотно закрывающейся крышкой. Для того, чтобы в биоматериал не попали примеси слюны и слизи, перед сбором образца для исследования проводится тщательное очищение ротовой полости и носоглотки.
Анализу подлежит только свежая мокрота, выделенная в результате продолжительного откашливания.
Сбор мокроты на посев с определением чувствительности к антибиотикам проводят до начала лечения антибактериальными препаратами. В противном случае полученный результат может быть ложноотрицательным.
Результаты
Исследование мокроты больного с целью определения антибактериальной чувствительности включает в себя:
С помощью различных методов определения чувствительности возможно не только выделение спектра антибактериальных препаратов, обладающих губительным воздействием на выявленные микроорганизмы, но и установление минимально приемлемой для положительного терапевтического эффекта концентрации веществ.
В каких ситуациях посев мокроты необходим
Необходимо учитывать, что дыхательные пути содержат нормальную микрофлору, некоторые виды которой при ослабленном иммунитете могут стать патогенными. Наиболее частыми возбудителями воспалительных заболеваний дыхательных путей являются золотистый стафилококк, гемофильная палочка, клебсиелла, стрептококк, энтеробактерии, а также микроскопические грибки. При туберкулезе выявляется палочка Коха.
Как проводится исследование
Забор мокроты должен быть произведен до начала приема антибиотиков и осуществляется 3 способами: путем отхаркивания, аспирацией или с помощью бронхоскопии. Перед этим пациент должен почистить зубы и прополоскать рот. Полученный образец герметично упаковывают и отправляют в лабораторию, где в течение 2 часов он должен быть посеян в чашки Петри на питательную среду. Этот метод называют бактериологическим. При образовании колоний микроорганизмов производится их идентификация. Обнаружение поселений, созданных патогенными бактериями, является важным диагностическим критерием.
Следующий этап исследования-это определение чувствительности микробов к антибиотикам. Для этого чаще используется метод дисков: небольшие диски, пропитанные растворами различных антибактериальных препаратов, помещаются в колонии бактерий. Далее отслеживается скорость гибели колонии вокруг них. Чем быстрее это происходит, тем эффективнее антибиотик.
Расшифровка полученных данных
Бактериологический способ дает возможность не только определить тип возбудителя и его реакцию на антибиотики, но и подсчитать его количественно. Содержание 10/5 и более патогенных микроорганизмов на 1 мл мокроты считается этиологически значимым признаком.
Результат посева дает важнейшую информацию о причине заболевания, его тяжести и помогает выбрать правильный путь лечения.
Автор: Уразбахова Анар Жаксылыковна
Определение чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам (ддм) в Москве
Исследование чувствительности возбудителя инфекции к антибактериальным препаратам с целью назначения оптимальной схемы лечения бактериальной инфекции.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Определение чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам (ддм)?
Подробное описание исследования
Бактерии представляют собой одноклеточные микроорганизмы, составляющие основную массу микробиома человека. Выделяют так называемые полезные бактерии, необходимые для поддержания иммунитета, образования витаминов, расщепления пищи и других процессов в организме; кроме того, существуют условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.
Условно-патогенные бактерии могут присутствовать в организме человека, не вызывая проблем со здоровьем. Однако в случае нарушения состава микробиома, снижения иммунитета человека или развития других благоприятных условий их численность увеличивается, что приводит к развитию заболеваний.
В ряде случаев организм способен самостоятельно справиться с инфекцией, однако чаще может потребоваться назначение антибактериальных препаратов для борьбы с возбудителем.
С момента появления первого антибиотика пенициллина в XX веке было разработано множество лекарств, уничтожающих бактерии. Тем не менее микроорганизмы постоянно изменяются, вырабатывая устойчивость (резистентность) к различным антибактериальным средствам. Распространение антибиотикорезистентности бактерий вызвано частым, бесконтрольным и неадекватным назначением этих препаратов.
Особенную проблему представляют внутрибольничные инфекции. Их возбудители часто устойчивы ко многим антибиотикам, то есть демонстрируют полирезистентность. Поэтому при подозрении на развитие внутрибольничной инфекцией обязательно требуется проведение бактериального посева с оценкой чувствительности выделенных микроорганизмов к антибактериальным препаратам.
Среди полирезистентных бактерий особое место занимает возбудитель туберкулеза — Mycobacterium tuberculosis. Данный микроорганизм развивает резистентность к лекарственным препаратам путем спонтанных мутаций в своем геноме, что привело к появлению такой актуальной проблемы, как увеличение случаев возникновения туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью. Важно также отметить, что согласно клиническим рекомендациям, людям, страдающим туберкулезом, в обязательном порядке необходимо проводить на фоне лечения оценку чувствительности микроорганизма к антибиотикам с определенной периодичностью.
Перечень антибактериальных средств, воздействующих на возбудителя, определяется конкретно для каждого вида интересующего специалиста микроорганизма. Обнаружение чувствительности к тому или иному антибактериальному средству помогает врачу назначить эффективную терапию.
Некоторые заболевания приводят к попаданию бактерий в биологические жидкости и среды организма, которые изначально стерильны, например, спинномозговую жидкость или кровь. В подобной ситуации исследование полученной культуры бактерий на устойчивость к антибактериальным средствам особенно важно, поскольку позволит раньше назначить этиотропную терапию, направленную непосредственно на возбудителя инфекции, улучшая тем самым течение и прогноз заболевания.
Чувствительность бактерий к антибиотикам постоянно меняется и может быть различной даже у микроорганизмов одного вида, что подчеркивает важность и обязательный характер проведения данного исследования.
Определение чувствительности к антибактериальным препаратам всего спектра выделенной микрофлоры в Москве
Бактериологическое исследование, направленное на определение чувствительности выделенной микрофлоры к антибиотикам для подбора терапии.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Определение чувствительности к антибактериальным препаратам всего спектра выделенной микрофлоры?
Подбор терапии заболеваний с учетом чувствительности микрофлоры к антибиотикам.
Подробное описание исследования
Попадание микрофлоры в те или иные участки человеческого тела происходит уже при рождении, в процессе прохождения родовых путей матери. Далее во время грудного вскармливания осуществляется заселение желудочно-кишечного тракта микроорганизмами. Ребенок растет, и вместе с этим происходят изменения в структуре микробиома его кожи и органов. Значительные изменения связаны с введением прикорма, прорезывания зубов. Так, в кишечнике ребенка первого года жизни преобладают бактерии типов Proteobacteria и Actinobacteria. Ближе к 3-м годам микробиом становится ближе к взрослому по составу. В кишечнике детей этого возраста уже обнаруживается больше бактерий типов Firmicutes и Bacteroides.
Микробиом каждого человека уникален, однако имеются некоторые общие черты. Независимо от органа, в структуре микрофлоры имеются эубиотические виды бактерий, которые также называют полезными, и условно-патогенные виды. Эубиотические бактерии существуют в симбиозе с организмом человека и выполняют много важных функций. Например, в кишечнике они участвуют в переваривании поступившей пищи, образовании витамина К. Кроме того, устойчивый состав микробиома с преобладанием полезных бактерий обеспечивает полноценную иммунную защиту того или иного органа.
Условно-патогенные виды бактерий могут обнаруживаться в норме, но их доля в структуре микрофлоры у здорового человека небольшая. Рост численности условно-патогенных микроорганизмов, наряду со снижением количества представителей эубиотической флоры, может приводить к развитию инфекционных заболеваний.
В подобном случае необходима терапия препаратами антимикробного действия — антибиотиками и бактериофагами — вирусами, убивающими бактерии. Неоправданно широкое применение антибактериальных средств привело к появлению у микроорганизмов механизмов устойчивости (резистентности). Они способны вырабатывать ферменты, разрушающие антибиотики, изменять проницаемость мембраны клетки, активно выводить из нее поступающее лекарство. Ввиду этого, выбор антибактериальной терапии необходимо осуществлять с учетом того, способен ли препарат подействовать на возбудителя инфекции.
Определение чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам (ддм) в Нижнем Новгороде
Исследование чувствительности возбудителя инфекции к антибактериальным препаратам с целью назначения оптимальной схемы лечения бактериальной инфекции.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Определение чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам (ддм)?
Подробное описание исследования
Бактерии представляют собой одноклеточные микроорганизмы, составляющие основную массу микробиома человека. Выделяют так называемые полезные бактерии, необходимые для поддержания иммунитета, образования витаминов, расщепления пищи и других процессов в организме; кроме того, существуют условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.
Условно-патогенные бактерии могут присутствовать в организме человека, не вызывая проблем со здоровьем. Однако в случае нарушения состава микробиома, снижения иммунитета человека или развития других благоприятных условий их численность увеличивается, что приводит к развитию заболеваний.
В ряде случаев организм способен самостоятельно справиться с инфекцией, однако чаще может потребоваться назначение антибактериальных препаратов для борьбы с возбудителем.
С момента появления первого антибиотика пенициллина в XX веке было разработано множество лекарств, уничтожающих бактерии. Тем не менее микроорганизмы постоянно изменяются, вырабатывая устойчивость (резистентность) к различным антибактериальным средствам. Распространение антибиотикорезистентности бактерий вызвано частым, бесконтрольным и неадекватным назначением этих препаратов.
Особенную проблему представляют внутрибольничные инфекции. Их возбудители часто устойчивы ко многим антибиотикам, то есть демонстрируют полирезистентность. Поэтому при подозрении на развитие внутрибольничной инфекцией обязательно требуется проведение бактериального посева с оценкой чувствительности выделенных микроорганизмов к антибактериальным препаратам.
Среди полирезистентных бактерий особое место занимает возбудитель туберкулеза — Mycobacterium tuberculosis. Данный микроорганизм развивает резистентность к лекарственным препаратам путем спонтанных мутаций в своем геноме, что привело к появлению такой актуальной проблемы, как увеличение случаев возникновения туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью. Важно также отметить, что согласно клиническим рекомендациям, людям, страдающим туберкулезом, в обязательном порядке необходимо проводить на фоне лечения оценку чувствительности микроорганизма к антибиотикам с определенной периодичностью.
Перечень антибактериальных средств, воздействующих на возбудителя, определяется конкретно для каждого вида интересующего специалиста микроорганизма. Обнаружение чувствительности к тому или иному антибактериальному средству помогает врачу назначить эффективную терапию.
Некоторые заболевания приводят к попаданию бактерий в биологические жидкости и среды организма, которые изначально стерильны, например, спинномозговую жидкость или кровь. В подобной ситуации исследование полученной культуры бактерий на устойчивость к антибактериальным средствам особенно важно, поскольку позволит раньше назначить этиотропную терапию, направленную непосредственно на возбудителя инфекции, улучшая тем самым течение и прогноз заболевания.
Чувствительность бактерий к антибиотикам постоянно меняется и может быть различной даже у микроорганизмов одного вида, что подчеркивает важность и обязательный характер проведения данного исследования.